本试剂盒仅限于科学研究，不应用于医学诊断。人表皮生长因子（EGF）ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附检测（ELISA）。在预先包被adropin（AD）抗体的微孔中，依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经过温育后彻底洗涤。随后，使用底物TMB进行显色，TMB在过氧化物酶的作用下转化为蓝色，最终在酸性条件下呈现黄色。颜色的深浅与样品中的adropin（AD）浓度呈正相关。最后，利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），从而计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法：

1. 血清：使用无热原和内毒素的试管，操作时尽量避免细胞刺激。收集血液后，3000转离心10分钟以迅速分离血清和红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝，3000转离心30分钟后取上清。

3. 细胞上清液：同样通过3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水混合，进行捣碎后，3000转离心10分钟获取上清。

5. 保存：如样本未及时检测，建议分装为一次性用量并冻存于-20℃，避免反复冻融。样本在室温下解冻时应确保其均匀充分解冻。

操作注意事项：

试剂盒包含标准品（S0-S5），其浓度依次为：0、25、50、100、200、400 pg/mL。准备20×洗涤缓冲液时，需要将蒸馏水按1:20稀释，即将1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水混合。

在使用过程中，需绘制标准曲线：在Excel中将标准品浓度设置为横坐标，OD值设置为纵坐标，以此绘制标准品线性回归曲线，并根据曲线方程计算各样本浓度值。

AG百家乐不对试剂盒的性能做任何保证，使用前请仔细阅读说明书，确保实验结果的准确性。