宿主细胞DNA的来源宿主细胞在生物医疗制品的开发中扮演着重要角色。许多生物制品，包括传统疫苗、重组蛋白、抗体药物、细胞治疗及基因治疗等，通常采用中国仓鼠卵巢细胞（CHO）、非洲绿猴肾细胞（Vero）、人胚肾细胞（HEK293）、大肠杆菌（E.coli）、酵母等作为表达载体。在下游纯化过程中，通过阴离子交换层析去除宿主细胞DNA（Host Cell DNA，HCD），尽管工艺能够有效去除HCD等残留杂质，仍可能存在少量HCD残留。这样的外源DNA可能引发潜在的免疫原性及安全问题，因此HCD的检测是生物制品生产中一个重要的质量控制指标。

HCD检测的重要性宿主细胞残留的DNA在体内可能产生多种负面影响，包括：● 致癌性: 残留的DNA可能引入致癌基因，导致细胞转化为肿瘤细胞，例如Ad5E1A和SV40的作用。● 感染性: 宿主细胞DNA中可能含有感染性病毒基因，通过复制和转录产生感染性病毒粒子，如HIV-1。● 免疫源性增加: 宿主细胞基因组中的CpG序列可能通过Toll样受体（TLR）激活免疫反应。● 潜在重组风险: 宿主细胞基因组中的LTR序列可能激活周围的原癌基因，从而导致癌变。

HCD的检测方法根据《AG百家乐中国药典》2020年版，通则3407收录了三种外源性DNA残留量的检测方法：DNA探针杂交法、荧光染色法及定量PCR法。DNA探针杂交法通过加热使外源性DNA变性为单链，然后与特异性标记的单链DNA结合，并与阳性对照比较后测定残留量。该方法的特点包括：样品DNA量小于10pg时易受其他化学物质影响，结果不稳定，检测时间较长。荧光染色法则结合双链DNA荧光染料在特定波长下发出荧光信号，荧光强度与DNA浓度成正比，但容易受到干扰，须防止DNase污染。定量PCR法针对宿主细胞DNA设计特异性引物和荧光标记探针，其敏感性及专一性高，是中国药典推荐的检测标准方法，能够准确检测痕量的残留DNA。

宿主细胞残留DNA标准产品特点AG百家乐的新款宿主残留DNA检测产品涵盖了多种细胞类型，包括CHO、E.coli、Vero、HEK293等。其试剂盒的引物探针序列源自药典，无需全面验证实验，只需方法确认。基于定量PCR方法开发，检测灵敏度可达0.003 pg/μL，并且与其他DNA无交叉反应，降低假阳性率。该产品在严格的生产管理体系下运营，批次间差异可控在CV＜10%。提供手动提取与自动化仪器提取的完整解决方案，保证在2小时内快速完成检测，并确保定量准确性。

性能数据标准品采用国家标准品标定，确保其质量可靠。CHO、Vero、E.coli和酵母的引物探针序列同样源自药典，具备优良的灵敏度、特异性及重现性。提取过程简单方便，试剂经过预装，从而实现稳定的室温存放。全自动化仪器提取结合预封装版本试剂盒，能够灵活适应实际需求。

相关参考文献：[1] 国家药品监督管理局药品审评中心，体内基因治疗产品药学研究与评价技术指导原则（试行），2022年05月[2] 国家药典委员会，中华人民共和国药典（2020年版）[3] 闫璐瑶、张家友、杨晓明，《生物制品中宿主细胞残留DNA检测的研究进展》，国际生物制品学杂志，2021，44（3）：170-174。